说起PCR实验相信大家都是耳熟能详,特别是分子生物学实验室可以说是PCR仪常鸣简直不能再了解了。但是PCR实验的发明和发展可能很多人都不甚了解,今天小编先带大家重温一下PCR实验的发明过程以及发展历程吧。PCR一般公认是穆里斯(K. Mullis)发明的,他还因此获得了1993年的诺贝尔化学奖。穆里斯是一名生物化学家,曾在加州大学伯克利分校攻读博士学位,他专长是有机合成。他在Cetus公司从事寡核苷酸合成工作。他在Randall Saiki的帮助下开发出了PCR实验。但是当时他们使用的还是大肠杆菌的DNA聚合酶,也就是Klenow聚合酶。但是这种酶在60℃的时候就会失活,因此需要每一个循环重新加酶。这样的做法不但繁琐,而且价格昂贵。PCR得以推广是通过中国台湾科学家钱嘉韵女士的文章了解到有耐热的DNA聚合酶,Cetus公司从Thermus aquaticus中提取了耐热DNA聚合酶,也就是Taq酶。Taq酶的发现使得PCR可以实现自动连续循环,使得PCR实验得以推广开来。
自PCR问世以来,寻找酶学性能更好,保真度高的DNA聚合酶的实验就没有停止过。科学家们发现了Vent、Deep、Tli、Pfu、UTTma和KOD1等耐热保真度高的DNA聚合酶,其中Pfu酶以优异的校正功能得到了广泛的关注。不过Pfu酶也有缺点,那就是来自酶本身的3’-5’核酸外切酶活性的干扰。这使得Pfu酶的延伸速率较低,长距离模版的扩增能力较弱,不过由于研发人员对Pfu酶的基因编辑,使得这两项缺点得到了大大的改善。说了这么多PCR的故事,显然机智的小伙伴肯定猜到我们友谊中联肯定要上市PCR相关的产品了。你们猜的没错,我们这次新推出了金普来(Gene-Protein-Link)的两款PCR Mix试剂盒。
2×PCR Mix(+Dye)
可扩增5kb质粒DNA;3kb动植物基因组DNA
无需添加Loading Buffer可直接点样电泳
PCR产物可直接用于TA克隆
2×HI-FI PCR Mix
采用经过工程改造的Pfu高保真DNA聚合酶
可扩增长达40kb的λDNA;20kb的基因组DNA;10kb的cDNA片段
可用于细菌、真菌、植物组织、动物组织或全血样品的直接PCR
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