RIPA Buffer（Radio Immunoprecipitation Assay Buffer）作为一种简单高效的细胞裂解液已经被使用了几十年，在蛋白质研究领域，RIPA Buffer 已经成为了所谓的“金牌”标准，然而这个金牌真的万无一失吗？RIPA提取的蛋白会有缺陷吗？
大家都知道，RIPA 提取蛋白通常会产生两个不同的部分：即 RIPA 可溶组分和 RIPA 不可溶组分。 一般来说，只有 RIPA 可溶组分被用于下游实验，而 RIPA 不可溶组分被丢弃。但是这些被丢弃的RIPA不可溶组分中是否有蛋白成分？对于这个问题，最近有研究者对被丢弃的RIPA不可溶组分进行了分析，利用一种新的柱式快速蛋白提取法，很方便地和 RIPA 提取法做平行实验比较。
 实验方法：
分别使用柱式法和 RIPA 裂解液提取小鼠肝脏和小鼠脾脏总蛋白。
Lane1. 柱式法提取按照厂商说明进行操作，提取蛋白后无不可溶性组分产生。
Lane2. RIPA 裂解液提取，组织进行匀浆后，加裂解液摇床孵育 30 分钟后，12 000 xg 离心 10 分钟。
Lane3. RIPA 提取残留的不溶性组分使用柱式法再次进一步提取。
12% 的 SDS-PAGE 结果如下：

Figure 1. Comparison of protein profiles extracted by Minute kit and RIPA buffer. Lanes 1, 2 and 3 are proteins extracted by Minute kit, RIPA buffer and insoluble fraction of RIPA extraction respectively.
实验结果
两种方法提取的蛋白谱相似，但是不完全相同。通过 RIPA 提取后，在低分子量范围（lane 2）蛋白显著减少，而在剩余的不溶部分再次提取后（lane 3）显著增加，lane 2 和 lane 3 蛋白谱有很大差别，大量蛋白在不可溶部分丢失，蛋白质的丢失是不成比例的，并且具有选择性。
        两种不同样品丢失的蛋白谱明显不同，丢失蛋白的范围覆盖了大于 120 KD 到小于 20 KD 的蛋白。不同样品的蛋白质丢失是不可预测的。然而，离心管柱法商业试剂盒提取蛋白不产生不可溶组分，更快速，可获得更高产量更完整的蛋白质图谱。
英文特生物技术股份有限公司（Invent Biotechnologies, Inc.）采用专利的离心管柱技术生产的蛋白质提取试剂盒，为蛋白提取分离带来了新方案，从原有的溶液法转换为革命性的柱式提取法。所有产品均具有超快速，易用，高产及重复性强的特性。在短短几年中，产品以其卓越的品质赢得了世界各国越来越多的科研，药物开发及临床诊断机构的青睐。
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