小鼠间充质干细胞(MSCs)用于研究免疫分子学机制,包括免疫调节,各种免疫失调及人体细胞治疗和组织再生的临床前应用研究。如何在生成和扩增小鼠MSCs的过程中降低血细胞污染并保持MSC的分化潜能一直是个挑战。
使用Stemcell MesenCult™扩增试剂盒(Mouse; Catalog #05513),可以用更少的代数获得同等数量的富集后的小鼠MSCs。
小鼠MesenCult™扩增试剂盒的优势?
高效 从原代开始即表现出强劲的扩增势头和显著的富集水平。
灵活配搭 优化用于小鼠骨髓,密质骨和脂肪来源的MSCs和MEFs。
功能性 在保证小鼠MSC扩增的同时,确保其三系分化潜能。
可靠 严格的原材料筛选和质量控制减小了批次间的差异并提高了实验的重现性。
实验数据
图1:CFU-F检测结果对比图。使用含有和不含有MesenPure™的MesenCult™扩增培养基,或者其它商品化培养基培养小鼠骨髓(Bone marrow, BM)来源的MSCs。使用(A) MesenCult™扩增培养基(Control)或(B)MesenCult™扩增培养基 + MesenPure™的培养体系。使用(C)商品化培养基1或(D)商品化培养基2。接种密度:5x104个细胞/cm2。
图2:使用MesenCult™扩增培养基长期培养扩增小鼠骨髓来源的MSCs。
图3:使用含有或不含有MesenPure™的MesenCult™扩增培养基培养的小鼠骨髓或密质骨来源的MSC的多谱系分化潜能。添加MesenPure™在培养早期可观测到更富集的MSCs,与对照组相比可见更多和更密集的分化结果。(A)在MesenCult™扩增培养基中培养的小鼠BM MSCs(Control)可以分化为(B)脂肪细胞和(C)成骨细胞。(D)在添加有MesenPure™的MesenCult™扩增培养基中培养的小鼠BM MSCs可分化为(E)脂肪细胞和(F)成骨细胞。我们正在检测小鼠BM MSCs向软骨细胞的分化情况。(G)在MesenCult™扩增培养基中培养的小鼠CB BM MSCs(Control)可以分化为(H)脂肪细胞,(I)成骨细胞和(J)软骨细胞。脂肪来源的间充质干细胞和间充质祖细胞,以及小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs)也可使用MesenCult™扩增试剂盒进行培养,这些细胞也具有向脂肪和成骨细胞分化的潜能(结果未显示)。脂肪细胞使用Oil Red O染色。成骨细胞使用碱性磷酸酶和硝酸银(von Kossa)染色。软骨细胞使用Alcian Blue和Fast Red染色。
图4:使用MesenCult™培养扩增小鼠骨髓来源的MSCs的流式检测结果。小鼠骨髓来源的MSCs在MesenCult™扩增培养基(Control)或添加有MesenPure™的培养基中培养。Passage 2的MSCs使用间充质细胞表面标记物,CD106和Sca1和造血细胞标记物,CD45染色。染色后的细胞通过流式进行检测。流式结果显示,对照组培养的MSCs具有明显的CD45+造血细胞群和CD45-(CD106+ and Sca1+)的MSCs细胞群。加入MesenPure™后,与对照组相比,CD45-(CD106+ and Sca1+)的MSCs细胞群得到了富集。
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