RNAscope 方法可替代传统的ISH/FISH RNA原位检测的方法，同时单分子检测灵敏度提供了原位对单个细胞基因表达的描绘机会,释放RNA生物标记的全部潜能。
操作步骤：
Step 1  透化
通过RNAscope®预处理试剂盒处理载玻片上固定好的组织或细胞，以暴露目标RNA。

Step 2  杂交
RNAscope®的20对针对靶基因设计的Z型目标探针与目标RNA杂交。

Step 3  信号放大
RNAscope®检测试剂盒通过信号扩增序列与显色标记有序地互补结合从而扩大信号。

Step 4  可视信号形成
在透视光学显微镜或者多光谱成像系统的观测下，每一个目标RNA分子以一个点状信号的形式呈现。
Step 5  量化分析
显微镜下直接计数或者使用RNAscope® SpotStudio™ or HALO自动化图像分析软件对每一个细胞中的RNA单分子信号进行精确定量分析。

没有抗体？没问题！不用IHC，来做RNAScope吧！ 所有样品种类都可以：培养细胞、TMA、PMBC、FFPE或冰冻组织切片！验证您在表达分析中鉴定出的所有基因！

RNAscope®探针设计与信号放大系统的优势:

1.灵敏度

每三对Z形探针对就足以实现对一个RNA分子的检测，在RNA分子出现部分序列不能被有效暴露或者部分降解等情况下，20对Z形探针对的设计保障了足够强劲有效的检测RNA。
探针特性：

每一个Z形探针包含三个结构元素：

Z型探针底部是一个18到25碱基长度的序列能够互补结合到目标RNA上，这个序列是基于目标序列的不同,以及独特的结合特征而进行的特异性设计。

Z型探针的中部是一个间隔序列，链接了探针的上下两端。

Z型探针的顶端是一个14碱基长度的尾部序列，因而一对Z形探针对的顶端序列组合成一段28个碱基长度的结合区以供信号放大前体序列的结合。

2.特异性

Z形探针对的设计屏蔽了背景噪音。单独一个Z形探针对即使结合上非目标序列也无法提供信号放大前体序列结合所需要的足够长度，从而防止了对于非特异信号的扩增，保障了特异性。

3.单分子量级的可视性与量化分析

此20x20x20x的引物设计与信号放大原理让单一RNA分子能够在标准的显微镜下以一个点状信号的方式可视化呈现。

4.能够探测到降解的RNA

得益于其相对短小的目标结合区域(Z形探针对的底端40到50个碱基长度)，此Z形探针对的设计为检测到部分降解的RNA提供了保障。

ACD创立于2006年，坐落于美国加利福尼亚州的硅谷中心，作为新兴的分子病理诊断的领导者，开发了基于细胞和组织测试的RNAscope®专利技术和定量平台, 并可应用于个体化医疗领域。应用RNAscope®进行RNA生物标志物的检测，可应用于肿瘤研究、感染性疾病、干细胞研究、免疫学、病毒性、神经生物学以及相关领域的基础医学研究，并已在包括Nature、Science等知名国际期刊发表近260篇高水平文献，友谊中联专业代理ACD产品，给您更优质的服务！