1.细胞凋亡的诱导
用化学调节剂来刺激细胞使其发生凋亡，此步关键是诱导条件的确定。
2.细胞凋亡的分析及检测
通过细胞凋亡关键靶标的分析，来确定凋亡的发生。可以用细胞免疫荧光（IF-IC）或者免疫印记实验（WB），也可用ELISA 和多靶点分析试剂盒。
3.实验的对照
通过与实验对照的比较，来确定实验样本是否发生细胞凋亡。
Caspase 家族是细胞凋亡过程中的关键元件，其激活与超常表达均引起细胞凋亡，因此又称死亡蛋白酶，可通过与众多蛋白因子的相互作用调控细胞凋亡。正常状况下，胞质中的 Caspase 3无活性，以 Pro-caspase 3形式存在。当细胞接受凋亡刺激时，它会被剪切成 cleaved-caspase 3从而被激活，进而诱导细胞发生凋亡。
caspase 3 基因(CASP 3)最初在人类Jurkat-T 淋巴细胞中被克隆出的, 该基因编码一个32 kDa 的半胱氨酸蛋白酶 CPP32, CPP32及其p20和p11重组体可以诱导 sf9 昆虫细胞发生凋亡。Caspase 3又被称为细胞凋亡的执行者, 以其具有剪切管家蛋白和DNA片段的功能, 被认为是参与凋亡途径的关键效应分子。
Caspase 3酶原上有四个酶切位点 Asp9、Asp28、Asp175和Asp181， 其中在 Asp175和 Asp181处切割产生 p20（1-175氨基酸）和 p11(181-277氨基酸)大小亚基，大亚基进一步在 Asp28出切割去掉N末端前肽，而Asp9处切割产生 p19大亚基，其与 Caspase 3酶原自身活化有关。
凋亡检测
采用带有荧光标记的Annexin V与PI双染的方法，通过流式细胞术可区分不同凋亡时期（早期或中晚期）的细胞，从而检测细胞凋亡。
友谊中联细胞凋亡产品列表
| 货号 | 名称 | 规格 | 价格 | 货期 |
| A01-020 | Annexin V-FITC/PI 凋亡检测试剂盒 | 20T | 600 | 现货 |
| A01-050 | Annexin V-FITC/PI 凋亡检测试剂盒 | 50T | 1000 | 现货 |
| A01-100 | Annexin V-FITC/PI 凋亡检测试剂盒 | 100T | 1800 | 现货 |
| A02-020 | Annexin V-eGFP/PI 凋亡检测试剂盒 | 20T | 600 | 现货 |
| A02-050 | Annexin V-eGFP/PI 凋亡检测试剂盒 | 50T | 1000 | 现货 |
| A02-100 | Annexin V-eGFP/PI 凋亡检测试剂盒 | 100T | 1800 | 现货 |
| A03-020 | Annexin V-Alexa Fluor 488/PI 凋亡检测试剂盒 | 20T | 600 | 现货 |
| A03-050 | Annexin V-Alexa Fluor 488/PI 凋亡检测试剂盒 | 50T | 1000 | 现货 |
| A03-100 | Annexin V-Alexa Fluor 488/PI 凋亡检测试剂盒 | 100T | 1800 | 现货 |
| A04-020 | Annexin V-Alexa Fluor 647/PI 凋亡检测试剂盒 | 20T | 600 | 现货 |
| A04-050 | Annexin V-Alexa Fluor 647/PI 凋亡检测试剂盒 | 50T | 1000 | 现货 |
| A04-100 | Annexin V-Alexa Fluor 647/PI 凋亡检测试剂盒 | 100T | 1800 | 现货 |
| A05-020 | Annexin V-PE/7-AAD 凋亡检测试剂盒 | 20T | 600 | 现货 |
| A05-050 | Annexin V-PE/7-AAD 凋亡检测试剂盒 | 50T | 1000 | 现货 |
| A05-100 | Annexin V-PE/7-AAD 凋亡检测试剂盒 | 100T | 1800 | 现货 |
友谊中联流式细胞术技术服务
仪器名称：ACEA公司NOVOCYTE D3130流式细胞仪（3激光13色）
报告时间：1-3个工作日
| 编号 | 内容 | 价格 |
| F01 | 流式细胞检测开机费（检测费大于300元免收） | ￥300 |
| F02 | 贴壁细胞消化（客户提供胰酶） | ￥10元/样本 |
| F03 | 贴壁细胞消化（客户不提供胰酶） | ￥20元/样本 |
| F04 | 流式细胞术检测(双色检测，客户自带抗体)≤30份样本 | ￥50元/样本 |
| F05 | 流式细胞术检测(双色检测，客户自带抗体)＞30份样本 | ￥35元/样本 |
| F06 | 流式细胞术检测(双色检测，使用我司抗体)≤30份样本 | ￥80元/样本 |
| F07 | 流式细胞术检测(双色检测，使用我司抗体)＞30份样本 |
￥60元/样本 |
Proteintech的 caspase 3单抗（货号：66470-1-Ig）在没有经过凋亡刺激的样品中，只能检测到 32kDa 的 caspase 3，当受到凋亡刺激后，能够检测到 cleaved-caspase 3，完美检测caspase 3前体及剪切体（17 kDa和19 kDa）。
caspase 相关抗体
CST有很多关于凋亡通路蛋白的阳性对照，最重要的是这些阳性对照的具体诱导条件都有说明，可以作为建凋亡细胞模型的参考，如在Hela细胞中，血清饥饿过夜，然后用1 μM依托泊苷（Staurosporine ）处理3小时，可以诱导出 Cleaved Caspase-3 (Asp175)蛋白。
以下是CST研究凋亡信号通路中激活的caspase蛋白及其他相关蛋白的处理条件，供大家参考，更多详情请登陆CST官网（或微信公众号）了解。
| Protein | Cell Line | Treatment |
| Cleaved PARP (Asp214) | HeLa,L-929,C6 | Serum-starve overnight, Staurosporine (1 µM for 3 hr) |
| Cleaved Caspase-3 (Asp175) | HeLa | Serum-starve overnight, Staurosporine (1 μM for 3 hr) |
| Jurkat | Etoposide (25 µM for 5 hr) | |
| Cleaved Caspase-1 (Asp297) | THP-1 | TPA (80 nM overnight) plus LPS (1 µg/ml for 8 hr) |
| Cleaved Caspase-6 (Asp162) | HeLa | Serum-starve overnight, Staurosporine (1 μM for 3 hr) |
| Cleaved Caspase-7 (Asp198) | Jurket | Etoposide (25 µM for 5 hr) |
| HeLa | Serum-starve overnight, Staurosporine (1 μM for 3 hr) | |
| Cleaved Caspase-8 (Asp391) | THP-1 | CHX (10 μg/ml) and hTNF-α (20 ng/ml) overnight |
| Cleaved Caspase-8 (Asp384) | THP-1 | CHX (10 μg/ml) and hTNF-α (20 ng/ml) overnight |
| Cleaved Caspase-8 (Asp387) | CTLL-2 | Cycloheximide (10 µg/ml overnight) plus mTNF-α (20 ng/ml for 4 hr) |